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位置：中国电力采购与招标网 > 招标信息 > 中标公告 > [BA202400447]人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大

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[BA202400447]人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响（测试加工服务）

所属地区：吉林发布日期：2024-05-08

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[BA202400447]人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响（测试加工服务）备案成交公告

发布时间：2024-05-08 15:48:29

采购信息

项目编号	BA202400447	项目名称	人参益元颗粒对化疗后免疫功能低下大鼠及Lewis荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响（测试加工服务）
经办人单位	第一医院（白求恩第一临床医学院）	经办人	吴荻
预算金额	123000.00 人民币	成交金额	123000.00 人民币
成交供应商	宝瑞金（吉林）生物科技有限公司	质保期	24 月
联系地址	吉林省-长春市-高新技术产业区宇光街399号	采购单位	吉林大学第一医院（白求恩第一临床医学院）
付款方式	服务完毕验收合格后100%付款。
供应商联系手机	18043180234	服务时间	2024年05月09日至 2024年05月11日
服务地址	吉林省-长春市-高新技术产业区宇光街399号
验收方式	以成交单为准，参考相关内容进行验收。验收程序以甲方职能部门规定为准。
售后服务要求	（一）乙方不能按承诺提供服务或所提供的服务不符合成交单规定标准，甲方有权拒收。同时，乙方向甲方支付成交单款总额5%的违约金。（二）乙方逾期交付服务成果时，每逾1日乙方向甲方偿付成交单款总额3‰的滞纳金。逾期超过30天后，甲方有权决定是否继续履行成交单。
采购材料	自主采购.jpg

明细清单

采购品目	其他医学研究与试验发展服务	名称	测试加工费
单位	项	数量	1
单价	¥123,000.00	总价	¥123,000.00
范围/服务内容及要求	附件一服务范围/内容及要求实验一（一）研究内容观察人参益元颗粒对 Lewis 荷瘤小鼠瘤体生长和免疫功能的影响。成人每日 14g（小鼠：12.33*14g/60kg=2.88g/kg）（二）研究方法 1. 实验材料 1.1 实验细胞实验细胞采用小鼠 Lewis 肺癌细胞细胞株。细胞株使用含 10%胎牛血清和 1% 青链霉素的高糖 DMEM 培养基，在 5%CO2、37℃条件下培养，稳定传代至 4-5 代备用。 1.2 实验动物实验动物购自于北京维通利华实验动物技术有限公司，采用 8 周龄 C57BL/6J 雌性小鼠，55 只，体重 18-20g。 2 实验方法 2.1 皮下接种用 PBS 将 Lewis 细胞制备成细胞悬液，根据预实验调整细胞悬液浓度至指定浓度（在 5×10 6 /mL 上下选择，需要根据预实验结果判定该批细胞株增殖活性）。在超净台上操作，用 75%酒精消毒 C57BL/6 小鼠右腋窝部皮肤，准备细胞接种注射前使用移液枪将预先配制好的细胞悬液充分吹散，用注射器吸取 Lewis 肺癌细胞细胞悬液 0.2mL，针头轻轻刺入皮下，推入肿瘤细胞悬液。 2.2 人参益元药液配制本研究使用的人参益元颗粒由吉林省中医药科学院制剂室提供，药物组成：黄人参、黄芪、佛手、白芍、鸡血藤、甘草，规格：每袋装 10g，一次 1 袋，一日 1 次。称量 2.88g，蒸馏水定容至 10mL。 2.3 动物分组及干预随机选取 10 只小鼠作为空白对照组，其余小鼠接种 Lewis 细胞，接种后 1 周，检查小鼠成瘤情况，用手指轻轻触摸小鼠右侧腋下皮肤，若接种成功则可触及约黄豆粒大小的结节。选取造模成功的荷瘤小鼠 40 只，按体质量随机分为 4 组(每组 10 只)：中药组、顺铂组、中药联合顺铂组(中西药组)和模型组。从接种后第 8 天开始，给予荷瘤小鼠相应药物干预： ①对照组：按 10mL/kg 每日灌服蒸馏水，连续灌胃 21 天，并从第 1 天开始隔天腹腔注射生理盐水 0.4ml； ②模型组：按 10mL/kg 每日灌服蒸馏水，连续灌胃 21 天，并从第 1 天开始隔天腹腔注射生理盐水 0.4ml； ③顺铂组：从第 1 天开始，隔天腹腔注射顺铂注射液 0.4ml(浓度 2mg/kg)，共注射 10 次，同时按 10mL/kg 每日灌服蒸馏水 21 天； ④中药组：从第 1 天开始每日灌胃人参益元颗粒 10mL/kg，连续灌胃 21 天，并隔天腹腔注射生理盐水 0.4ml，共注射 10 次； ⑤中西药组：按照人参益元颗粒 10mL/kg 每日连续灌胃 21 天，同时隔天腹腔注射顺铂注射液 0.4ml,共 10 次。 3. 观测指标 3.1 一般观察和体重每天检查小鼠的体重和一般情况，包括行为、皮毛状态、食物摄入量和排便情况。 3.2 瘤体体积测量分别于干预周期的第 1、4、7、10、14、20 天，用电子游标卡尺测量各组小鼠皮下肿瘤的长径和短径，根据长径(a)和短径(b)来计算肿瘤体积，计算公式为： V(cm3)=ab²/2,以干预天数为横轴，小鼠肿瘤体积为纵轴，绘制各组小鼠的肿瘤生长曲线。（每组 10 只） 3.3 肿瘤组织 HE 染色将各组小鼠皮下移植瘤剥离后制成组织切片，采用ＨE 染色方法对肿瘤组织进行染色，以观察其组织细胞形态。（每组三只，切片做全扫描） 3.4 计算抑瘤率各组进行干预 21 天后脱颈椎处死小鼠，完整剥取小鼠右侧腋部肿瘤组织，滤纸吸干瘤体表面后立即采用精密电子天平称取肿瘤质量，并进行瘤体拍照。根据肿瘤质量计算各组抑瘤率，抑瘤率=(模型组平均瘤质量一药物干预组平均瘤质量)/模型组平均瘤质量×100%。（每组 10 只） 3.5 外周血和淋巴细胞(PBMC)的测定给药 21 天后，取小鼠眼窝静脉血样。用全自动血液分析仪检测白细胞(WBC)、血小板(PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)及淋巴细胞(PBMC)。（每组 5 只） 3.6 免疫器官指数处死小鼠前先进行眼球采血，眼球采血后处死小鼠，尽量完整摘取胸腺及脾脏，冲洗并用滤纸吸干水分后称重。胸腺及脾脏指数计算公式：胸腺指数=(胸腺重量(mg)×1000)/小鼠体重(g)，脾脏指数=(脾脏重量(mg)×1000)/小鼠体重(g)。（每组 10 只） 3.7 免疫相关指标检测流式细胞仪检测脾脏中 CD4+、CD8+以及 CD4／CD8 水平；（每组 3 只） ELISA 法检测外周血和脾脏中相肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素－γ (IFN-γ) 含量。（每组 5 只）费用：测试加工费：75000 实验二 1、人参益元颗粒在小鼠体内对放化疗所致的免疫功能低下的拮抗作用雄性 SD 大鼠 40 只，随机分为正常对照组、模型对照组及人参益元颗粒低、中、高剂量干预组共 5 组，每组 8 只，称重并标记。（1）免疫低下模型建立：实验第 1d 至第 7d，模型组及各治疗组采用腹腔注射 20mg/mL 的 CTX 注射液，按 40mg/kg，首次加倍，隔天 1 次，连续 4 次的造模方法，正常对照组用等体积的生理盐水代替。（2）动物给药：第 1d 至第 21d，药物治疗组在免疫抑制同时分别给予不同剂量人参益元药液灌服，高剂量组 2.88g/kg，中剂量组 1.44 g/kg ，低剂量组 0.72 g/kg ，灌胃体积均为 10 mL/kg ，灌胃 1 次/日，正常对照组和模型组大鼠每天予等量蒸馏水灌胃。（3）检测指标。 ①流式细胞术检测外周血中 CD3+、CD4+；（每组 8 只） ②ELISA 法检测外周血相关免疫细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及干扰素- γ(IFN-γ) 含量；（每组 8 只） ③Western blot 检测脾组织 TNF-α蛋白的表达；（每组 3 只） ④外周血淋巴细胞(PBMC)的测定全自动血液分析仪检测白细胞(WBC)、血小板 (PLT)、红细胞(RBC)、血红蛋白(HGB)及淋巴细胞(PBMC)。（每组 8 只）费用：测试加工费：48000 实验结果以报告形式提供，提供所试剂仪器等信息，数据形成表格以及 PRISM 软件绘制的柱状图，病理图等，可提供分析软件的文件，用以后期自由调整结题材料和论文的图信息

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